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日期:2020-12-21
在自然環(huán)境中,鐵還原是細(xì)菌胞外電子傳遞的主要形式之一。鐵還原菌(FeRM)不僅在礦物和腐殖質(zhì)的還原中起關(guān)鍵作用,而且還參與硫化合物和有機(jī)物的氧化。此外,F(xiàn)eRM在廢水處理、生物修復(fù)和生物電化學(xué)系統(tǒng)等許多工程過(guò)程中至關(guān)重要。鐵還原菌在系統(tǒng)發(fā)育上普遍存在,目前還沒(méi)有合適的16S rRNA或基于功能基因的檢測(cè)方法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。本文章作者合成了一種對(duì)Fe2+具有高靈敏度和選擇性的耗氧Fe2+特異性熒光化學(xué)探針(FSFC)。該FSFC可以從純培養(yǎng)、不同細(xì)菌共培養(yǎng)或含沉積物樣品中選擇性地鑒定和定位活性FeRM。FSFC的熒光強(qiáng)度可以作為細(xì)菌培養(yǎng)物中Fe2+濃度的指標(biāo)。與單細(xì)胞分選技術(shù)相結(jié)合,該探針可以幫助從豐富的沉積物群落中識(shí)別和分離FeRM。 首先作者設(shè)計(jì)合成了一種對(duì)Fe2+具有高靈敏性和選擇性的特異性熒光探針(FSFC),F(xiàn)SFC能夠定位和鑒定具有活性的FeRM,其熒光強(qiáng)度能夠作為細(xì)菌培養(yǎng)物中Fe2+濃度指示。將FSFC熒光探針與單細(xì)胞分選技術(shù)結(jié)合,實(shí)現(xiàn)可視化識(shí)別和分選鐵還原菌。 由于碲原子對(duì)萘二甲酰亞胺熒光團(tuán)的重原子作用,在沒(méi)有Fe2+的情況下,F(xiàn)SFC是非熒光的,F(xiàn)e2+可以觸發(fā)FSFC的脫氫反應(yīng)并引起強(qiáng)烈的熒光,研究表明不同濃度Fe+對(duì)FSFC熒光強(qiáng)度具有影響,并且熒光強(qiáng)度與Fe2+濃度呈現(xiàn)線性關(guān)系,因此,對(duì)于大多數(shù)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)樣品,F(xiàn)SFC可以作為Fe2+或鐵還原菌的指示劑。接下來(lái)作者驗(yàn)證FSFC的選擇性,實(shí)際環(huán)境中其他金屬離子可能會(huì)影響FSFC對(duì)Fe2+的熒光影響,通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明所有被測(cè)金屬分別對(duì)FSFC沒(méi)有顯著的影響效應(yīng)。并且穩(wěn)定性測(cè)試實(shí)驗(yàn)表明FSFC在5h內(nèi)保持較好的穩(wěn)定性,優(yōu)于經(jīng)典的鄰菲羅啉法。